纳豆激酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

纳豆激酶是一种良好的天然蛋白酶类溶栓物质.国内外许多学者对该酶进行了基因工程研究,但在克隆表达过程中出现了许多长短不同的基因片段.本研究通过原产日本的优质纳豆中分离鉴定出高产纳豆杆菌N07并提取该菌株的全基因组；通过PCR手段扩增出能编码纳豆激酶信号肽,前导肽和成熟肽的前纳豆激酶酶原基因NK1,以及能编码纳豆激酶成熟肽的纳豆激酶基因NK2,构建了纳豆激酶基因的表达载体pET30a-NK1和pET30a-NK2,转化E.coli BL21后在大肠杆菌中表达,并进行了活性分析.结果发现,纳豆激酶酶原基因片段NK1能成功表达出有活性的分泌型纳豆激酶；而纳豆激酶基因片段NK2的表达产物为无活性的包涵体.在对NK1和NK2的比较研究后可知,纳豆激酶酶原基因片段NK1能在大肠杆菌中很好的分泌表达,这将为纳豆激酶基因工程的深入研究奠定基础.

关键词：纳豆激酶基因、大肠杆菌、克隆、表达

所属期刊栏目：29

分类号：Q785;Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：重庆市自然科学基金重点项目CSTC2008BA5030

在线出版日期：2012-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：77-81