家蚕卵蛋白的SDS-PAGE分析

摘要：

本研究探讨了蛋白质提取方法、十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)条件对家蚕卵蛋白分离效果的影响.分别用裂解液提取法、TCA沉淀法、冷丙酮沉淀法和TCA-丙酮沉淀法制备蛋白质样品,然后进行6％～12％、6％～15％两种梯度胶的SDS-PAGE,获得了不同提取方法和电泳条件下的电泳图谱用以比较家蚕卵蛋白分离效果.结果表明用TCA-丙酮沉淀法除盐,再用含9mol·L-1尿素、4％ CHAPS、1％ DTT的裂解液重悬,最适合家蚕卵蛋白提取；6％～12％梯度胶对家蚕卵蛋白的分离较为适宜.利用这一优化方法对家蚕感染微孢子虫的蚕卵和正常蚕卵进行了比较研究,在分子量66 kD和85 kD处找到了与感染微孢子虫相关的蛋白,为进一步进行正常蚕卵和感染微孢子虫蚕卵的蛋白质组学研究奠定了基础.

关键词：家蚕卵、微孢子虫、蛋白质提取、十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳

所属期刊栏目：29

分类号：Q503;Q51(一般性问题)

资助基金：重庆市自然科学基金estc2011jja1322

在线出版日期：2012-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：35-37