BcMF3反义基因植物表达载体的构建及其对拟南芥的遗传转化

摘要：

根据编码白菜(Brassica rapa L. ssp. chinensis,syn B. campestris ssp. chinensis)果胶甲酯酶的BcMF3 基因cDNA 序列内部第1 343～1 797个碱基之间序列设计引物,从白菜花蕾cDNA中PCR扩增出455 bp的片段,把该片段作为反义基因连接至双元载体pBI12l上,得到了植物表达栽体pBI-B3,并用"三亲杂交"法导入农杆菌LBA4404菌株中,PCR扩增和酶切结果表明所构建的植物表达载体pBI-B3含有BcMF3 反义基因片断,并已导入了根癌农杆菌(Agrobacterinm tumefuciens)中;采用花序浸润法转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)后,播种筛选浸润植株的种子获得了5 株卡那霉素抗性植株,PCR 扩增证明BcMF3反义片段成功整合到拟南芥基因组中;转基因拟南芥子代(T2)的抗性分离符合孟德尔分离比例,表明外源基因是单一位点插入.

关键词：反义基因、拟南芥(Arabidopsis thaliana)、BcMF3、白菜、表达载体、遗传转化

所属期刊栏目：2

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中国科学院资助项目30370975;浙江省科研项目021102536

在线出版日期：2006-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：76-79