羊毛硫氨酸合成酶C样蛋白2在细胞抗氧化中的作用及机制研究

摘要：

目的 探讨羊毛硫氨酸合成酶C样蛋白 2(LanCL2)在细胞抗氧化过程中的作用及相关机制.方法 采用不同浓度(0、30、75、100、150、200 μmol/L)的过氧化氢(H2O2)诱导处理人胚胎肾细胞(HEK293T)24 h以诱导氧化应激,通过蛋白质印迹技术检测LanCL2的表达;分别转染GFP、GFP-LanCL2过表达质粒至HEK293T细胞,在 200 μmol/L H2O2 刺激条件下,通过PI/Hoechst 33342染色检测细胞死亡;向HEK293T细胞中转染Myc、Myc-LanCL2、Myc-GSTP1、Myc-LanCL2-His和GSTP1-His质粒,分别作为Myc组、Myc-LanCL2组、Myc-GSTP1组、Myc-LanCL2-His组(诱导纯化后)和GSTP1-His组(诱导纯化后),将未经任何处理的细胞作为Ctrl组,采用紫外分光光度计检测各组谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性及Myc组与Myc-LanCL2组的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性.结果 与无H2O2 刺激相比,在 100、200 μmol/L H2O2 刺激后HEK293T细胞中LanCL2相对表达量升高(P<0.05);与GFP组相比,GFP-LanCL2组在 200 μmol/L H2O2 刺激后细胞死亡率下降(P<0.01);Myc-LanCL2组GST活性与Myc组及Myc-GSTP1组相比,差异无统计学意义(P>0.05);与Ctrl组相比,GSTP1-His组具有较高的GST活性(P<0.001);而Myc-LanCL2-His组GST活性与Ctrl组相比,差异无统计学意义(P>0.05);Myc-LanCL2组GPx活性与Myc组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 LanCL2能被氧化应激诱导,并减轻氧化应激介导的细胞死亡,但LanCL2不具有GSH依赖的抗氧化酶(GST和GPx)活性.

关键词：羊毛硫氨酸合成酶C样蛋白2、氧化应激、谷胱甘肽硫转移酶、谷胱甘肽过氧化物酶

所属期刊栏目：18

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金;四川省自然科学基金青年项目;发育与再生四川省重点实验室开放基金;成都医学院科研项目

在线出版日期：2023-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：416-420,433