口服幽门螺杆菌多价表位疫苗的构建及其免疫效果研究

摘要：

目的 构建口服幽门螺杆菌多价表位疫苗CTB-HapA-UreA-UreB-CagA(CTB-HUUC),并初步研究其在BABL/c小鼠体内的免疫治疗效果.方法 文献查找幽门螺杆菌相关抗原的显性表位序列 HpaA88-100、HpaA132-141、UreA27-53、UreA183-203、UreB229-251、UreB317-329、UreB321-339、UreB373-385、UreB438-452、UreB546-561、CagA149-164、CagA196-217,通过 Linker 将其串联,并在 N 端引入分子内佐剂 CTB序列,构建重组质粒 pET28a(+)/ctB-hpaA-ureA-ureB-cagA〔pET28a(+)/ctB-HUUC〕.再将重组质粒转化大肠杆菌 BL21 (DE3)中,IPTG进行诱导表达、层析纯化,获得高纯度的 CTB-HUUC 重组蛋白,并采用 Western Blot 对其进行鉴定.GM1-ELISA检测重组蛋白CTB-HUUC体外结合 GM1的能力.6周龄BABL/c小鼠,感染幽门螺杆菌1次/d,连续感染4次;末次感染后4周,灌胃CTB-HUUC重组蛋白200 μg/次,1次/周,连续免疫4次.末次免疫后2周,处死小鼠,取小鼠胃组织进行幽门螺杆菌培养计数.结果 成功获得高纯度的CTB-HUUC重组蛋白,Western blot检测CTB-HUUC可与抗幽门螺杆菌悉尼株(SS1株)小鼠血清及鼠抗 CTB 单抗产生特异性反应.GM1-ELISA检测重组蛋白CTB-HUUC体外可结合 GM1,具有良好的佐剂活性.CTB-HUUC组小鼠胃组织进行幽门螺杆菌培养计数结果为6.14×103CFU/g、CTB组为5.72×106CFU/g、PBS组为6.70×106CFU/g.结论 口服幽门螺杆菌多价表位疫苗CTB-HUUC对感染幽门螺杆菌的BABL/c小鼠具有显著的治疗效果.

关键词：幽门螺杆菌、多价表位疫苗、尿素酶、N-乙酰神经氨酰乳糖结合原纤维血凝素、细胞毒素相关蛋白A

所属期刊栏目：13

分类号：R57(消化系及腹部疾病)

资助基金：湖北省卫生厅项目;十堰市科学技术研究与开发项目

在线出版日期：2018-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：129-134