hSmarca2-b转录变体编码的hBRM-b异构体促进Hep-3B细胞凋亡

摘要：

目的 考察hSmarca2-b转录变体编码的hBRM-b异构体蛋白是否具有促进Hep-3B肿瘤细胞凋亡的作用.方法 利用pEGFP-N1质粒构建5种包含hSmarca2-b转录变体的5′调控序列、全长开放阅读框的部分cDNA序列以及能进一步编码产生hBRM-b-EGFP融合蛋白的过表达载体;脂质体转染过表达载体分别进入hSmarca2-b表达缺失的Hep-3B肝癌细胞,通过RT-PCR 和 Western Blot分别验证其mRNA的转录及hBRM-b-EGFP融合蛋白的表达,并通过荧光成像进一步验证融合蛋白的产生;流式检测转染hBRM-b-EGFP过表达载体后的Hep-3B细胞,考察相对于空载体组凋亡情况的改变.结果 RT-PCR显示,Hep-3B细胞转染后hSmarca2-b变体表达水平从无到较高,Western Blot检测到符合理论大小的融合蛋白,荧光成像时可见转染细胞发出的绿色荧光,证明过表达载体构建成功;相对于空载体组,其中4种变体的过表达均使凋亡细胞比例增加近100%,单侧t检验显示差异有统计学意义(P<0.05).结论 hSmarca2-b转录变体编码的hBRM-b异构体蛋白具有促进Hep-3B肝癌细胞凋亡的作用.

关键词：hSmarca2-b、hBRM-b异构体、可变剪接、溴区结构域、AT-hook模体

所属期刊栏目：12

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：四川省教育厅重点项目;发育与再生四川省重点实验室研究基金

在线出版日期：2017-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：247-253