纳豆激酶检测体系的建立及其跨膜转运途径初探

摘要：

目的 建立纳豆激酶(nattokinase,NK)酶联检测体系,探讨其跨膜转运机制.方法 采用杂交瘤技术筛选抗NK的单克隆抗体,竞争抑制法鉴定单抗识别的抗原表位,Western Blot测定单抗特异性,双抗夹心ELISA法进行单抗灵敏度测定,Caco-2细胞模型探讨NK跨膜转运机制,生物信息学预测NK穿膜相关序列.结果 筛选得到稳定分泌抗体且特异性识别NK的杂交瘤细胞6株,其中3株单抗识别相近的抗原表位,其余单抗识别不同的抗原表位;6株单抗检测NK的最小灵敏度分布为0.78～20.00 ng/mL;Caco-2细胞模型显示,胞吞作用不是NK跨膜转运的主要途径;生物信息学提示,NK中含有3段穿膜相关序列.结论 基于NK单抗建立的酶联检测体系,可有效监控NK跨膜转运过程,NK可能是依据蛋白转导结构域直接介导而实现其肠道吸收转运.

关键词：纳豆激酶、单克隆抗体、跨膜转运、蛋白转导结构域

所属期刊栏目：11

分类号：R977.3(药品)

资助基金：四川省教育厅项目;四川省科技厅项目;四川省卫生厅项目;四川省卫生厅项目;成都医学院科研项目;大学生创新项目;大学生创新项目;大学生创新项目

在线出版日期：2016-12-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：532-536,564