NGAL重组蛋白的表达与纯化及其促进结肠癌转移的研究

摘要：

目的 研究NGAL重组蛋白促进人结肠癌细胞SW480转移的作用机制.方法 通过基因工程方法构建重组表达载体pet32a-tev-NGAL,转化大肠杆菌(BL21-DE3)进行表达;采用亲和层析纯化,并用tev酶进行酶切获得NGAL重组蛋白;Transwell与基质胶实验检测NGAL对细胞迁移、侵袭能力的影响;Western blot检测NGAL对肿瘤转移相关蛋白表达的影响;ELISA检测不同肿瘤分期结肠癌患者血液中NGAL表达情况.结果 成功构建pet32a-tev-NGAL原核表达载体,并通过体外表达与纯化获得NGAL重组蛋白;该蛋白促进SW480的迁移和侵袭;Western blot检测结果表明,NGAL激活EMT信号通路;ELISA结果表明,NGAL表达量与肿瘤恶化程度成正相关.结论 NGAL通过激活EMT信号通路促进结肠癌细胞SW480转移.

关键词：NGAL重组蛋白、结肠癌细胞、肿瘤转移

所属期刊栏目：10

分类号：R735.3+5(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金No:J1103604

在线出版日期：2015-06-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：142-146,151