培养Schwann细胞用于构建毛囊神经嵴干细胞定向分化饲养层

摘要：

目的 培养原代Schwann细胞,用于构建毛囊神经嵴干细胞饲养层构建.探索Schwann细胞(Schwann cells)对胎牛血清浓度的依耐性；检测Schwann细胞在不同血清浓度下的活性及分泌状态,并应用此饲养层定向诱导毛囊神经嵴干细胞分化.方法 原代培养及纯化Schwann细胞；用不同血清浓度的胎牛血清(FBS)培养基培养Schwann细胞,测定并用四氮唑盐(MTT)比色法检测Schwann细胞生长及增殖情况；使用S100特异性标识抗体间接免疫荧光法与荧光染料Hoechst 33342对Schwann细胞进行鉴定.用ELISA方法检测Schwann细胞的分泌因子.利用丝裂霉素C处理Schwann细胞建立饲养层,培养Schwann细胞和毛囊神经嵴干细胞.结果 体外成功培养Schwann细胞,用S100间接免疫荧光法与核染料Hoechst33342鉴定Schwann细胞呈阳性表达,纯度约95％,成功培养毛囊神经嵴干细胞.无血清的培养基可使Schwann细胞生长状态良好.饲养层细胞能够稳定分泌神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF),可诱导毛囊神经嵴干细胞定向分化.结论 无血清的培养基更利于毛囊神经嵴干细胞饲养层的构建.饲养层Schwann细胞可持续分泌NGF和BDNF等神经营养因子,可成为使毛囊神经嵴干细胞定向分化的稳定饲养层细胞.

关键词：Schwann细胞、饲养层、毛囊神经嵴干细胞、定向分化

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分类号：R651.3(外科学各论)

资助基金：中华医学会-欧莱雅中国人健康皮肤研究项目;四川省教育厅自然科学研究项目;成都医学院校管基金资助项目

在线出版日期：2012-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：309-315