抑制消减杂交技术筛选肺炎链球菌多耐药相关DNA片段

摘要：

目的 筛选肺炎链球菌多耐药相关DNA片段,探索肺炎链球菌多耐药的分子机制.方法 提取多耐药菌株09062407与标准菌株ATCC49619基因组DNA,应用抑制性消减杂交技术得到富含差异DNA片段的消减混合物,与pEASY-T3克隆载体连接并转化到TP10感受态细胞中,构建多耐药肺炎链球菌差异DNA消减文库.结果 耐药株与敏感株间差异片段大量富集,得到大小200～1 500 bp弥散状DNA条带;将这些差异DNA片段富集后构建成消减文库,随机挑取192个白色克隆,经PCR扩增,155个克隆插入有200～800 bp大小片段.结论 抑制消减杂交技术能有效筛选肺炎链球菌多耐药株与敏感株间差异DNA片段,可进一步通过克隆鉴定等生物信息学方法 寻找与肺炎链球菌多耐药相关基因.

关键词：抑制消减杂交、DNA文库、肺炎链球菌、多耐药

所属期刊栏目：5

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：成都中医药大学科研项目ZRYB200806

在线出版日期：2011-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：317-320