匍匐翦股颖叶肉细胞原生质体瞬时表达体系的建立

摘要：

为了建立稳定、高效的匍匐翦股颖(A grostis stoloni f era L.)叶肉细胞原生质体瞬时表达体系,本研究以匍匐翦股颖'Penn-A4'的叶片为材料,分析不同因素对其叶肉细胞原生质体分离的影响,确定其原生质体分离的最佳条件.结果表明:苗龄为4周的翦股颖无菌苗叶片在甘露醇为0.6 mol·L-1的酶解液中,28℃酶解4 h后,可分离得到较高活力原生质体、提取量约为6.75×106个·g-1;为进一步检测该原生质体是否可有效的应用在蛋白功能研究中,构建了热激蛋白基因AsHSP26.8-GFP重组质粒,并在聚乙二醇(PEG-4000)介导下将其导入叶肉细胞原生质体中进行了亚细胞定位;通过激光共聚焦显微镜观察到AsHSP26.8定位于叶绿体.综上所述,本研究建立了一套较为完整的匍匐翦股颖叶肉细胞原生质体分离与瞬时表达体系,为探究匍匐翦股颖的功能基因组学研究奠定了基础.

关键词：匍匐翦股颖;原生质体;瞬时表达;亚细胞定位

所属期刊栏目：29

分类号：S254(农业航空)

资助基金：河北省自然科学基金;国家自然科学基金;河北省现代农业产业技术体系草业创新团队专项资金

在线出版日期：2021-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2091-2097