山黧豆种子萌发特异性蛋白酶的分离纯化及酶学性质研究

摘要：

蛋白酶在种子萌发过程中参与了储藏蛋白水解等多种生理过程,为植物的生长发育提供氮源并在种子萌发的生化机制中有重要作用.本研究采用明胶酶谱法检测了山黧豆种子在不同萌发时间的蛋白酶表达情况.利用盐析、离子交换层析等方法从萌发6d的山黧豆种子中分离纯化了蛋白酶并对其基本酶学性质进行了研究.结果表明,山黧豆种子萌发特异性蛋白酶造成了种子萌发过程中高分子质量蛋白质的水解和较低分子质量蛋白质的积累.对纯化蛋白酶进行总蛋白含量、酶活力、酶比活力等检测表明,山黧豆蛋白酶的纯化倍数为6.58,蛋白得率为7.97％.山黧豆蛋白酶对金属离子的耐受性较高,添加Fe3+可以引起蛋白酶活性的显著增加.此外,该蛋白酶对血红蛋白和明胶的反应活性最高,其最适反应pH和温度分别为pH7和60℃.本研究为进一步研究山黧豆种子萌发过程中蛋白质水解与其内源毒素β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸积累的相互关系奠定了基础.

关键词：山黧豆、萌发种子、蛋白酶、分离纯化

所属期刊栏目：26

分类号：Q55(酶)

资助基金：中国博士后科学基金面上资助2016M590975;陕西省博士后科研项目2016BSHEDZZ119;中央高校基本科研业务费专项资金重点研究基地建设项目lzujbky-2018-kb05

在线出版日期：2019-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1497-1502