海雀稗SRAP-PCR分子标记体系优化及引物筛选

摘要：

以4个代表性海雀稗(Paspalum vaginatum)种质的叶片DNA为模板,采用L9 (34)正交试验设计,对影响海雀稗SRAP-PCR反应的Mg2+、dNTP、引物和TaqDNA聚合酶的用量进行了优化,并比较了不同浓度模板DNA对扩增的影响,以确定适合海雀稗的SRAP-PCR最佳反应体系.结果表明:海雀稗SRAP-PCR最佳反应体系为10×PCR buffer 1 μL、模板DNA50 ng、Mg2+ 2.5 mmol·L-1、dNTP150μmol·L-1、引物0.4μmol·L-1、TaqDNA聚合酶1.0U,总体积10 μL.利用该反应体系从100对引物中筛选出可扩增清晰条带的引物83对,在83对引物中选出多态性丰富的引物44对.SRAP-PCR反应体系的优化及引物筛选,为今后利用SRAP标记技术进行海雀稗遗传多样性研究、基因定位、遗传图谱的构建以及分子标记辅助育种提供技术支持.

关键词：海雀稗、SRAP标记、正交实验、体系优化、引物筛选

所属期刊栏目：24

分类号：S544.9;Q75(饲料作物、牧草)

资助基金：江苏省第四期“333高层次人才培养工程”项目;江苏省植物迁地保护重点实验室项目QD201301;江苏省农业自主创新项目CX142049;江苏省属公益类科研院所能力提升项目BM2015019

在线出版日期：2017-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1080-1086