鹰嘴豆ISSR反应体系的正交优化

摘要：

鹰嘴豆(Cicer arietinum)ISSR反应体系的建立可以为鹰嘴豆种质资源遗传多样性分析、遗传图谱构建和基因定位提供理论依据和技术参考.本研究以CTAB法提取的鹰嘴豆DNA为模板,采用L16 (45)正交设计直观分析法,对鹰嘴豆ISSR-PCR反应中的4个主要因素(Mg2+浓度,引物浓度,TaqDNA聚合酶浓度,dNTPs浓度)在4个水平上进行优化,并在最优ISSR-PCR反应体系的基础上对引物UBC826的最适退火温度进行筛选.结果表明:Mg2+和引物浓度对PCR扩增结果有显著影响,dNTPs和Taq酶的浓度变化对PCR扩增结果无显著影响.鹰嘴豆ISSR-PCR优化反应体系(25 μL)为:3 mmol·L-1 Mg2+,0.2 mmol·L1 dNTP,0.24 μmol·L-1引物,2 U TaqDNA聚合酶.UBC826最适退火温度为56℃.

关键词：鹰嘴豆、ISSR、反应体系、正交设计、优化

所属期刊栏目：23

分类号：Q341(遗传学分支学科)

资助基金：国家自然科学基金31360577;公益性行业农业科研专项201003019;教育部博士点基金20136202110005;现代农业产业技术体系建设专项资金CARS-40-09B

在线出版日期：2016-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1303-1309