华南象草原生质体分离及基因瞬时表达研究

摘要：

以华南象草(Pennisetum purpureum)幼叶鞘为材料,采用L16(45)正交试验设计,对分离原生质体过程中的纤维素酶浓度、离析酶浓度、酶解液pH、甘露醇浓度、酶解时间5个因素进行筛选,建立了高效的象草叶鞘原生质体分离体系,并进行目标基因的瞬时转化,以期为象草基因功能研究奠定基础.结果表明:叶鞘在含有1.5％纤维素酶R-10,0.75％离析酶R-10,0.5 mol·L-1甘露醇,pH为5.8的酶解液中酶解4h,原生质体产量达5.11×10 6个·gFW-1,活力达91.08％,酶解时间对象草原生质体产量和活力的影响最大.用PEG介导法将2个分别带有绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白的载体转入原生质体中,转化效率最高可达77.47％,共转化效率为8.79％.所分离的原生质体可用于基因的瞬时表达研究.

关键词：象草、原生质体、PEG介导、瞬时表达

所属期刊栏目：23

分类号：Q943.2;S543.9(植物学)

资助基金：国家自然科学基金3127249130972138;教育部高等学校博士学科点专项科研基金20124404110011

在线出版日期：2015-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：571-579