新疆大叶紫花苜蓿BADH基因转化体系的研究

摘要：

以新疆大叶苜蓿(Medicago sativa‘ Xinjiang Daye’)叶片作为转化受体,利用农杆菌介导法将从梭梭(Haloxylon ammodendron)中获得的甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)转化紫花苜蓿,研究选择剂卡那霉素对愈伤组织分化的影响,并采用正交试验设计优化了影响紫花苜蓿转化的4个主要因子,建立了农杆菌介导的紫花苜蓿高效转化体系,获得了转基因植株.结果表明:卡那霉素在愈伤组织分化培养时的上限浓度以50 mg·L-1为宜;转化过程中当浸染时间为5 min,菌液浓度OD600为0.2,外植体预培养6d,共培养后清洗外植体的头孢雷素(Cef)浓度为800 mg·L-1是最佳转化方案,抗性芽分化率达到65.5％;4个因子中菌液浓度对转化率影响最大,清洗外植体的Cef浓度和浸染时间影响次之,外植体预培养时间的影响最小.经PCR和RT-PCR检测,初步证明了BADH基因已经整合到紫花苜蓿中,转化率为16.0％.

关键词：紫花苜蓿、转化、农杆菌、BADH基因、转基因植株

所属期刊栏目：22

分类号：Q943.2(植物学)

资助基金：宁夏回族自治区自然基金项目NZl177;宁夏科技攻关计划项目2012ZYS041

在线出版日期：2014-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：359-365