10.3969/j.issn.1007-0435.2009.01.010
结缕草属植物ISSR-PCR反应体系研究
以SDS法提取的结缕草(Zoysiaspp.)叶片DNA为模板,应用正交试验设计,从Mg2+、dNTP、引物和DNA聚合酶并通过比较不同浓度的模板DNA对PCR扩增的影响,确立结缕草属植物ISSR-PCR反应的最佳体系.结果表明:各因素不同浓度对PCR反应结果有显著影响,正交设计可以用于ISSR反应体系建立,该方法建立的结缕草属植物ISSRPCR优化反应体系为10X Buffer、70 ng模板DNA、 Mg2+2.0 mmol·L-1、dNTP150μmol·L-1、Primer 0.3 μmol·L-1、Taq DNA聚合酶1.0 U,总体积20 μL;经对11份结缕草属植物进行检验,证明该体系稳定可靠.该体系的建立可为今后利用ISSR标记技术进行结缕草属遗传多样性研究、种质资源鉴定和亲缘关系分析等提供依据.
结缕草、ISSR-PCR、正交试验、体系优化
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Q943.2(植物学)
国家自然基金项目30571307;江苏省高技术项目BG2006320资助
2009-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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