马蔺ISSR-PCR反应体系的建立与优化

摘要：

根据正交试验设计原理,设计探索正交试验和细调正交试验以确定马蔺(Iris lacteal Pall. var. chinensis (Fisch.) Koidz) ISSR-PCR反应体系中各成分的浓度,从dNTP、Taq酶、Primers、Mg2+ 4种因素对马蔺ISSR反应体系进行了优化,得到适合马蔺的ISSR-PCR最佳反应体系,即25 μl的反应体系中含有dNTP 0.3 mmol/L、Taq酶1.5 U、Primers 0.4 μmol/L、Mg2+ 2.5 mmol/L以及1×buffer和50 ng模板DNA.通过对马蔺ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,得到这条引物的最佳退火温度为52℃.这一体系的建立为今后利用ISSR标记技术研究马蔺遗传多样性奠定了基础.

关键词：马蔺、ISSR-PCR、反应体系、正交优化

所属期刊栏目：16

分类号：S812;Q943(普通畜牧学)

资助基金：北京市科学自然基金项目6062012;院所基本科研业务费专项基金创新团队ywf-td-3

在线出版日期：2009-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：580-584,589