苜蓿基因组DNA提取和RAPD反应条件优选

摘要：

采用CTAB法、N2-SDS法、SDS法和改进的CTAB法,提取苜蓿基因组DNA,比较其分离效果.结果表明,改进的CTAB法为最佳提取法.对RAPD反应程序中的一些重要参数进行摸索和优化试验,建立适合苜蓿RAPD分析应用的体系组成为:反应液总体积25 μL,174 ng/μL模板DNA,2.5 μL 10x反应缓冲液,10碱基引物浓度0.1 μmol/L,Taq DNA聚合酶1 U,dNTP浓度0.3 mmol/L,Mg2+浓度2.5 mmol/L.PCR反应循环为:94℃ 4 min,36℃ 30 s,72℃ 1 min;94℃ 30 s,36℃ 30 s,72℃ 1 min,45个循环;72℃延伸10 min.

关键词：苜蓿、DNA提取方法、RAPD、反应条件

所属期刊栏目：9

分类号：S541;Q943(饲料作物、牧草)

资助基金：国家自然科学基金39870559

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：99-105