10.13463/j.cnki.cczyy.2023.04.011
石菖蒲挥发油促进牙周炎牙周膜干细胞增殖及迁移的作用机制研究
目的 研究石菖蒲挥发油调控磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜干细胞增殖及迁移的影响.方法 体外培养人牙周膜干细胞,分为对照组(不做干预),LPS组(8μg·mL-1?LPS),实验组[在8μg·mL-1?LPS的基础上加入50、100、150 mg·L-1浓度的石菖蒲挥发油,干预24 h,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定细胞活力并筛选确定150 mg·L-1石菖蒲挥发油为最适浓度].再将细胞分为对照组(不做干预),LPS组(8μg·mL-1 LPS),实验组(8μg·mL-1 LPS+150 mg·L-1石菖蒲挥发油),LPS+抑制剂组(8μg·mL-1 LPS+10μmol·L-1 PI3K/AKT通路抑制剂LY294002),石菖蒲挥发油+LPS+抑制剂组(8μg·mL-1 LPS+150 mg·L-1石菖蒲挥发油+10μmol·L-1 PI3K/AKT通路抑制剂LY294002),石菖蒲挥发油+LPS+激动剂组(8μg·mL-1 LPS+150 mg·L-1石菖蒲挥发油+10μmol·L-1 PI3K/AKT通路激动剂SC79),干预24 h.用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平;采用CCK-8法测定人牙周膜干细胞的细胞活力;采用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)细胞增殖实验测定人牙周膜干细胞的增殖率;采用细胞划痕实验测定牙周膜干细胞的迁移率;采用蛋白免疫印迹法(WB)检测人牙周膜干细胞周期素D1(Cyclin D1)及PI3K/AKT通路相关蛋白表达水平.结果 与对照组比较,LPS组细胞炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α表达水平显著升高,细胞活力显著降低(P<0.05),与LPS组比较,实验组加入不同浓度的石菖蒲挥发油后细胞活力提升,石菖蒲挥发油浓度为150 mg·L-1时细胞活力显著提高并且炎症因子显著降低(P<0.05),所以确定150 mg·L-1石菖蒲挥发油是最佳浓度,进行进一步的实验.与对照组比较,LPS组细胞增殖率和Cyclin D1蛋白表达水平显著降低,p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与LPS组比较,实验组和LPS+抑制剂组显著扭转了LPS诱导后人牙周膜干细胞中上述指标的变化(P<0.05);与实验组比较,石菖蒲挥发油+LPS+抑制剂组加入PI3K/AKT通路抑制剂后,细胞增殖率和Cyclin D1蛋白表达水平进一步显著升高,p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白表达水平显著降低(P<0.05),石菖蒲挥发油+LPS+激动剂组的这些指标变化与石菖蒲挥发油+LPS+抑制剂组趋势相反(P<0.05).结论 石菖蒲挥发油可以提高LPS诱导的牙周膜干细胞的增殖、迁移并抑制其炎症,通过上调Cyclin D1蛋白提高牙周膜干细胞的增殖,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT通路的信号转导相关.
牙周炎、牙周膜干细胞、石菖蒲挥发油、脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路、增殖、迁移
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R781.42(口腔科学)
河北省医学科学研究课题;沧州市科技计划自筹经费项目
2023-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
400-406
