10.3969/j.issn.1672-9870.2014.06.040
胞内分枝杆菌HSP 70基因的克隆、分析及原核表达
胞内分枝杆菌为致病性非结核分枝杆菌(NTM)之一,分布广泛,人畜均可感染,对人畜健康造成极大威胁。应用巢式PCR克隆胞内分枝杆菌HSP 70基因,利用在线分析软件对其进行生物信息学分析。构建原核表达载体pET 15b-HSP 70,同时进行诱导表达。结果显示,胞内分枝杆菌HSP 70基因完整,ORF基因全长1860bp,共编码619个氨基酸,HSP 70为酸性、亲水性蛋白质,不存在明显跨膜结构,含14个潜在磷酸化位点,亚细胞定位主要存在于细胞质中,无信号肽结构。二级结构预测,蛋白空间结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。同时,以同源建模法预测了HSP 70基因编码蛋白的三维立体结构。成功构建pET 15b-HSP 70原核表达载体,在原核表达系统中该载体可诱导表达70ku的HSP70重组蛋白。
胞内分枝杆菌、HSP 70基因、克隆、原核表达
Q785(基因工程(遗传工程))
吉林省科技发展计划项目20120235;吉林省科技发展计划项目20130206042N Y;省级创新训练项目2014S042
2015-01-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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