抗冻基因CBF2表达载体构建及转化紫花苜蓿的研究

摘要：

本研究以拟南芥基因组DNA为模板,用PCR方法扩增目的基因,连接到PGEM-T Easy Vector载体上构建成克隆载体T-CBF2.用BamHI和Sacl分别对克隆载体T-CBF2和植物表达载体PBIl21进行双酶切,获得目的片段和线性质粒.在T4 DNA连接酶的作用下进行定向连接,构建成植物表达载体P-T-CBF2.采用直接转化法将重组子导入根癌农杆菌EHA105.经PCR鉴定,重组质粒已成功导入根癌农杆菌中.通过农杆菌介导法转化和田苜蓿,现在已经得到转基因的苜蓿愈伤组织.

关键词：抗冻基因CBF2、载体构建、农杆菌、紫花苜蓿、转化

所属期刊栏目：20

分类号：S551+.703.4;Q945.7(绿肥作物)

资助基金：甘肃省农牧厅生物技术专项GNSW-2004-07

在线出版日期：2011-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：193-200