10.3321/j.issn:1004-5759.2003.02.018
AMV和WCMV在转基因红三叶中的基因累集
随着转基因技术的发展及其在植物育种中的应用,出现了一大批表现优良、经济效益高的转基因植物,但生产实践要求一种植物同时具有多个优良的转基因性状.目前解决这一问题的方法主要是基因累集(Gene pyramiding),就是将多个基因集中到同一植株,可以将已经转入1个基因的植株做原材料,用农杆菌介导或基因枪等方法将另一基因转进去.也可以采用人工杂交,在不同转基因植株之间进行人工授粉,从后代中筛选出所需要的基因型.本研究对抗苜蓿花叶病毒(AMV)的转基因红三叶和抗白三叶花叶病毒(WCMV)的转基因红三叶进行了人工杂交,以期获得兼有2个基因、同时抵抗2种病毒的新植株,为下一步的育种打好基础.几乎所有的杂交组合都结了种子,杂交一代的发芽率随杂交亲本转基因拷贝数的不同而有所变化,只有1个转基因拷贝的亲本其杂种发芽率最高.对所有幼苗先用PCR进行检测,从中挑出较理想的基因型作进一步的分子生物学分析.Southern和Northern印迹分析结果表明,有些杂交一代的转入基因多于1个拷贝,有一部分同时兼有2种抗病基因,并且得到了表达.为进一步检测其抗病性,对它们进行了温室接种和田间评估,结果显示,尽管有的个体Northern分析呈阳性,但在田间仍然对病毒敏感,不过其感病程度都比对照有显著降低.大多数兼有2种转入基因的植株都能同时抵抗2种病毒,可以作为免疫个体供下一步育种之用.与遗传转化相比,人工杂交以其操作简单、省时省力、预见性强和准确率高而具有明显优势,是常规育种方法在分子育种中的具体体现.
红三叶、转基因植株、分子生物学分析、人工杂交、抗病性
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S541.203.5(饲料作物、牧草)
2004-08-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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