家蚕中心体蛋白基因BmCnn的鉴定及表达分析

摘要：

Centrosomin(CNN)是中心粒周围物质(PCM)和星形微管组装所需的核心中心体蛋白,能将PCM锚定到中心粒上,并维持它们之间的适当连接,以确保有丝分裂时中心体的准确分离,进而保证细胞的正常分裂.PCR扩增得到家蚕中心体蛋白基因BmCnn的全长CDS序列,通过生物信息学分析BmCNN蛋白具有典型的CNN_1N结构域并在进化上保守;将PCR扩增产物亚克隆到原核表达载体pET-28a,随后将表达的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,Western blot检测该抗体能够特异性识别家蚕细胞中2种大小不同的BmCNN;利用免疫荧光分析BmCNN的亚细胞定位,结果显示BmCNN定位于细胞质中;半定量PCR检测BmCnn在家蚕5龄第3天幼虫精巢、卵巢、头部等组织中高表达,而在丝腺组织中低表达,Western blot对BmCNN的检测结果与之基本一致.研究结果可为后期解析BmCnn基因的功能奠定基础,为阐明BmCNN在不同细胞分裂形式中的功能差异及具体调控机制提供新的方向.

关键词：中心体蛋白、多克隆抗体、基因表达、胞质分裂

所属期刊栏目：48

分类号：S881.2;Q786(蚕桑)

资助基金：国家自然科学基金31872428

在线出版日期：2022-06-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：103-110