利用柞蚕核型多角体病毒表达系统表达谷氨酰胺果糖-6-磷酸酰胺转移酶

摘要：

谷氨酰胺果糖-6-磷酸酰胺转移酶(glutamine:fructose-6-phosphate amidotransferase,GFAT)是己糖胺生物合成途径(HBP)中的限速酶,与蛋白质糖基化修饰密切相关.本研究克隆的柞蚕GFAT基因(ApGFAT)CDS由2 022个碱基构成,编码674个氨基酸.将该基因连接到柞蚕杆状病毒转移载体pApM748BE后与ApNPV-Aph/egfp+共转染Tn-High Five细胞获得重组病毒.将重组病毒注射到柞蚕蛹体内,收集发病蛹血淋巴,用镍离子螯合柱纯化得到纯化蛋白,SDS-PAGE和Western blot检测表明,ApGFAT蛋白在柞蚕蛹体内得到成功表达,酶活力为0.978 μmoI/(min·mg).

关键词：柞蚕、谷氨酰胺果糖-6-磷酸酰胺转移酶、柞蚕核型多角体病毒表达载体系统

分类号：Q816;S885.1(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金;辽宁省自然基金项目

在线出版日期：2021-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：478-484