应用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞和幼虫体内表达β-淀粉样蛋白

摘要：

作为阿尔茨海默症(AD)重要神经病理学特征之一的脑内老年斑主要由β-淀粉样蛋白Aβ40和Aβ42聚集而成,Aβ42是其中的毒性成分.Aβ的特异性主动免疫对不同的转基因AD模型小鼠均有治疗作用,但临床试验中以注射方式给药容易诱发炎症反应.为了能够更好、更安全地采用主动的AB免疫疗法达到预防和治疗AD的目的,尝试用家蚕杆状病毒表达系统表达Aβ42蛋白.将Aβ42基因克隆入转移载体质粒pBacPAK8中,并使该重组质粒和家蚕杆状病毒Bm-BacPAK6线性化的DNA共转染家蚕卵巢培养细胞BmN,经筛选、纯化获得的重组病毒命名为BmNPV-Aβ42.用BmNPV-Aβ42感染BmN细胞和家蚕5龄起蚕后,利用Western blotting在BmN细胞和5龄幼虫血淋巴中均可检测到5 kD左右的特异性条带,证明重组Aβ42蛋白表达成功.ELISA检测显示,重组Aβ42肽在感染后第4天的BmN细胞和感染后第6天的5龄幼虫血淋巴中的表达量分别达到1.1 pg/个、2μg/mL.进一步提高Aβ42在家蚕杆状病毒表达系统中的表达效率,有望为研发预防和治疗阿尔茨海默症的可食性疫苗提供新型原料.

关键词：阿尔茨海默症、β-淀粉样蛋白、免疫、家蚕杆状病毒表达系统、培养细胞、幼虫血淋巴

所属期刊栏目：42

分类号：Q786;S886.9(基因工程（遗传工程）)

资助基金：浙江省自然科学基金项目No.Y3110354,浙江省教育厅科研项目No.Y201226220,国家高技术研究发展计划“863”项目No.2012ZX09102301-009,2011AA100603,浙江省高校生物学重中之重一级学科建设项目.

在线出版日期：2016-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：850-855