qRT-PCR检测柞蚕中肠热休克蛋白基因ApHSC70对微孢子虫入侵的响应

摘要：

为证实柞蚕热休克蛋白在柞蚕防御体系中的作用,利用RT-PCR技术在柞蚕5龄幼虫中肠组织克隆了一个热休克蛋白基因ApHSC70(GenBank登录号:KJ437496),并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测该基因在感染柞蚕微孢子虫的柞蚕中肠中的表达变化.该基因的开放阅读框(ORF)长1 959 bp,编码652个氨基酸,预测蛋白质分子质量为71.49 kD,等电点(pI)为5.38,具有细胞质特征基序,推测为一种组成型热休克蛋白;ApHSC70与斜纹夜蛾、棉铃虫同源蛋白质的序列相似度最高,分别达96.94％、96.33％.感染柞蚕微孢子虫后0-9h的柞蚕5龄幼虫中肠组织中,ApHSC70基因转录水平变化不大,但感染后12 h该基因的转录水平开始升高,至感染后21 h达到最高值.研究结果表明,柞蚕中肠组织的ApHSC70基因在柞蚕微孢子虫入侵时的表达变化呈现出一定的应激响应,表达量最高可上调近5倍,推测该基因可能参与了柞蚕的免疫防御过程.

关键词：柞蚕、热休克蛋白70、免疫防御、柞蚕微孢子虫、实时荧光定量PCR

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分类号：Q959.115+.92;Q786;S885.1(动物学)

资助基金：现代农业产业技术体系建设专项;辽宁省农业领域青年科技创新人才培养计划;辽宁省重大科技公关项目;辽宁省教育厅一般项目

在线出版日期：2015-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：300-307