家蚕防御素基因的序列特征与表达模式分析及原核表达试验

摘要：

家蚕防御素(defensin)是家蚕抗菌肽家族的主要成员之一,为家蚕先天性免疫的重要效应因子.采用生物信息学方法分析家蚕防御素基因BmdefA、BmdefB的序列中各有2个外显子,2个基因分别定位于家蚕第4号和第13号染色体上；等电点预测BmdefA带有负电荷,属于罕见的阴离子型抗菌肽,而BmdefB带有正电荷,属于常见的阳离子型抗菌肽；预测2个基因编码的成熟肽分子质量均在4 kD左右.用RT-PCR方法检测BmdefA在家蚕整个发育过程中有表达,且在检测的幼虫和成虫各组织中均有表达；BmdefB从幼虫5龄第3天到成虫期表达,雄性表达量高于雌性,且在5龄第3天幼虫的生殖腺、脂肪体和血细胞中高水平表达.家蚕防御素BmdefA、BmdefB具有不同的分子特性和表达特征,暗示它们在家蚕先天免疫过程中可能行使不同的功能,甚至可能具有不同的抗菌机理.构建融合GST标签的家蚕防御素基因原核表达载体,通过在大肠杆菌细胞内诱导表达,获得可溶性的目的蛋白,使用GST亲和层析柱初步纯化表达的融合蛋白并进行Western blotting鉴定,为进一步研究BmdefA、BmdefB的体外活性和抑菌机制奠定基础.

关键词：家蚕、防御素、BmdefA基因、BmdefB基因、序列特征、表达模式、原核表达

所属期刊栏目：38

分类号：S881.2;Q78(蚕桑)

资助基金：中央高校基本科研业务费专项XDJK2009C158;重庆市自然科学基金重点项目CSTC2008BA1008;西南大学研究生科技创新基金项目kb2010004

在线出版日期：2012-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：249-256