利用细菌转座子构建适于家蚕的Bac-to-Bac快速基因表达系统

摘要：

为了较好地解决家蚕杆状病毒基因表达系统(BmNPV expression system)在重组病毒构建和纯化过程中存在的重组率低、空斑分析技术繁琐、花费时间长等缺点,借鉴国外AcNPV Bac-to-Bac快速基因表达系统工作原理,对家蚕BmNPV基因组进行了改造.通过同源重组的方法,将含有单拷贝数细菌F复制子、插入有细菌转座子整合靶位点、编码LacZα肽的部分DNA片段和抗性选择标记基因的基因片段重组入家蚕BmNPV基因组,替换多角体蛋白基因,获得了家蚕BmNPV病毒穿梭载体BmBacmid;并利用供体质粒上的表达盒和细菌转座子以及细菌转座子的基因定位转移作用,在细菌体内实现外源目的基因向家蚕BmNPV基因组上的转移整合,快速完成重组BmNPV病毒的构建.

关键词：家蚕、杆状病毒、细菌转座子、表达系统

所属期刊栏目：32

分类号：S881.2;Q78(蚕桑)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2005CB121003;农业部科研项目2005-C5;浙江省科技厅资助项目2006C24015

在线出版日期：2006-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：183-188,中插1,中插2