人乳铁蛋白cDNA的克隆及在家蚕细胞中的表达

摘要：

从人的乳腺组织中克隆了人乳铁蛋白(hLF)cDNA,其DNA序列与GenBank中另外4个hLF cDNA序列具有高度的同源性(同源性达到99%).将人乳铁蛋白cDNA克隆在质粒pBacPAK8的BamHⅠ位点和XhoⅠ位点,构建成重组转移质粒pBacPAK-hLF.该质粒DNA与已线性化BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞BmN,在培养的贴壁细胞中挑出空斑,经过3轮纯化,获得重组病毒BmNPV-hLF.蛋白质免疫印迹法检测到在重组病毒感染的家蚕细胞中存在人乳铁蛋白基因的表达产物,分子量约78 kD,ELISA法测定结果表明家蚕细胞中重组人乳铁蛋白(rhLF)相对表达量在表达120 h达到最高值,约为13.5 mg/L.体外生物活性试验表明重组hLF对大肠杆菌JM109具有抑菌活性.

关键词：人乳铁蛋白cDNA、家蚕细胞、重组杆状病毒

所属期刊栏目：31

分类号：Q78;S881.2(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2005-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：280-285