梨小食心虫实时荧光PCR检测技术的建立与验证

摘要：

梨小食心虫(Grapholitha molesta)为我国常见蛀果性害虫,与其他梨果害虫的组织形态非常相似,仅凭形态学特征难以区分,需建立实时荧光PCR检测方法在基因水平上进行鉴定.通过样品核酸提取与质控,设计并验证荧光探针特异性,进一步通过优化反应条件和反应体系,结合特异性分析、灵敏性比对和盲样测试开发了梨小食心虫实时荧光定量PCR检测方法.结果表明:方法特异性强,重复性好(重复间变异系数为0.055～0.359),可靠性高(标准曲线中的R2值为0.991),检出限低(最低检出限3 pg/μL),盲样测试结果与形态学鉴定结果一致,能满足日常检验检疫需求.该操作方法简单易行,检测时限短(约3h),通量高,特别适合于大批量的抽样检查,可应用于梨小食心虫的检疫工作.

关键词：梨小食心虫、实时荧光定量PCR、快速鉴定

所属期刊栏目：23

分类号：S436.6(病虫害及其防治)

资助基金：浙江经贸职业技术学院省属高校基本科研业务费项目20SBYB03

在线出版日期：2023-07-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：60-66