ADU-S100/多柔比星原位疫苗在弥漫大B细胞淋巴瘤中的作用及机制研究

摘要：

目的:探讨ADU-S100/多柔比星原位疫苗在弥漫大B细胞淋巴瘤中的抗肿瘤作用及相关机制。方法:选择6周龄雌性BALB/c小鼠，采用小鼠B细胞淋巴瘤A20细胞株构建小鼠B细胞淋巴瘤双侧皮下肿瘤模型，采用随机数字表法将皮下荷瘤小鼠随机分为未治疗组（不接受任何治疗）、ADU-S100原位疫苗治疗组（瘤内注射干扰素基因刺激因子激动剂ADU-S100）、多柔比星原位疫苗治疗组（瘤内注射多柔比星）和ADU-S100/多柔比星原位疫苗治疗组（瘤内注射ADU-S100+多柔比星），每组5只。将荷瘤小鼠右侧肿瘤定义为近端肿瘤，左侧肿瘤定义为远端肿瘤，仅对近端肿瘤进行瘤内药物注射治疗，远端肿瘤不处理。肿瘤接种后第23天，采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏中CD11c
+树突细胞（DC）、CD8
+ CD11c
+ DC和CD80
+ CD11c
+ DC亚群的比例。采用A20肿瘤细胞裂解物体外刺激各组小鼠的脾细胞，应用流式细胞术检测各原位疫苗治疗组CD8
+ T细胞中5'-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷阳性（EdU
+）细胞和肿瘤坏死因子α阳性（TNF-α
+）细胞的比例，并使用乳酸脱氢酶（LDH）细胞毒性检测试剂盒测定各组细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的杀伤效应。在接种肿瘤后第7、12、17天通过腹腔注射抗小鼠CD8α（clone 53-6.7）抗体或同型对照抗体清除ADU-S100/多柔比星原位疫苗治疗小鼠体内的CD8
+细胞。肿瘤接种后第23天，测量ADU-S100/多柔比星原位疫苗联合抗小鼠CD8α（clone 53-6.7）抗体或同型对照抗体处理组小鼠近端和远端肿瘤体积，并采用流式细胞术检测两组小鼠脾脏中CD8
+ T细胞和CD8
+ CD11c
+ DC的比例，免疫组织化学染色法检测两组小鼠肿瘤组织中浸润的CD8
+ T细胞。
结果:在肿瘤接种后第11、14、17、20、23天，各治疗组小鼠的近端肿瘤、远端肿瘤体积均低于未治疗组小鼠（均
P<0.05）。未治疗组、ADU-S100原位疫苗治疗组、多柔比星原位疫苗治疗组和ADU-S100/多柔比星原位疫苗治疗组小鼠脾脏中募集的CD11c
+ DC亚群比例分别为（4.92±0.63）%、（7.54±0.84）%、（7.45±0.86）%和（11.63±0.85）%，差异有统计学意义（
F＝72.30，
P<0.001）；CD8
+ CD11c
+ DC亚群比例分别为（1.36±0.34）%、（4.02±0.43）%、（4.22±0.61）%和（6.11±0.73）%，差异有统计学意义（
F＝76.09，
P<0.001）；CD80
+ CD11c
+ DC亚群比例分别为（0.51±0.24）%、（1.69±0.23）%、（1.82±0.25）%和（4.09±0.39）%，差异有统计学意义（
F＝167.40，
P<0.001）。各原位疫苗治疗组的CTL杀伤效应以及CD8
+ T细胞中EdU
+细胞和TNF-α
+细胞的比例均高于未治疗组（均
P<0.05），ADU-S100/多柔比星原位疫苗治疗组的CTL杀伤效应以及CD8
+ T细胞中EdU
+细胞和TNF-α
+细胞的比例均高于ADU-S100原位疫苗治疗组和多柔比星原位疫苗治疗组（均
P<0.05）。ADU-S100/多柔比星原位疫苗+抗小鼠CD8α抗体处理组小鼠脾脏中CD8
+ T细胞和CD8
+ CD11c
+ DC细胞的比例均低于ADU-S100/多柔比星原位疫苗+同型对照抗体处理组（均
P<0.05），ADU-S100/多柔比星原位疫苗+抗小鼠CD8α抗体处理组小鼠近端和远端肿瘤体积均大于ADU-S100/多柔比星原位疫苗+同型对照抗体处理组（均
P<0.05）。
结论:ADU-S100/多柔比星原位疫苗可抑制小鼠B细胞淋巴瘤双侧皮下肿瘤模型中近端肿瘤的生长，并可产生能够部分抑制远端肿瘤生长的全身性抗肿瘤免疫效应，ADU-S100/多柔比星原位疫苗可能通过CD8
+ CD11c
+ DC介导的CD8
+ T细胞免疫应答发挥抗肿瘤免疫效应。

关键词：淋巴瘤，大B细胞，弥漫性、多柔比星、原位疫苗、模型，动物

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资助基金：河南省科技攻关计划212102310751;中原学者工作站项目214400510018;Key R&D and Promotion Project in Henan Province212102310751;Scientific Studio of Zhongyuan Scholars214400510018

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：29-36