脂多糖对小鼠视网膜Müller细胞和小胶质细胞共培养体系中炎症因子水平的影响及其机制

摘要：

目的:观察脂多糖(LPS)诱导小鼠视网膜单独培养Müller细胞和Müller细胞与小胶质细胞共培养 2种体系中的炎症反应,阐明Müller细胞与小胶质细胞的相互作用机制.方法:培养Müller细胞QMMuC-1和小胶质细胞BV2,免疫荧光染色方法观察2种细胞形态表现.实验分为单独培养对照组[QMMuC-1 细胞单独培养,采用磷酸盐(PBS)缓冲液处理]、共培养对照组(QMMuC-1细胞和BV2细胞共培养,细胞比例1∶1,采用PBS缓冲液处理)、单独培养实验组(QMMuC-1细胞单独培养,采用10 mg·L-1 LPS处理)和共培养实验组(QMMuC-1 细胞和BV2 细胞共培养,采用10 mg·L-1 LPS处理).采用免疫荧光染色法观察各组细胞中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组QMMuC-1细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平.结果:QMMuC-1细胞中神经胶质细胞标志物谷氨酰胺合成酶(GS)和GFAP阳性,BV2细胞中小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白分子1(Iba-1)阳性.与单独培养对照组比较,单独培养实验组QMMuC-1细胞中GFAP水平升高1.7倍(P=0.005);与共培养对照组比较,共培养实验组QMMuC-1细胞中GFAP水平升高2倍(P=0.003),细胞形态逐渐变成梭形;与单独培养实验组比较,共培养实验组QMMuC-1细胞中GFAP水平升高1.4倍(P= 0.0006),大部分细胞呈梭形.与单独培养对照组比较,单独培养实验组QMMuC-1细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达水平升高,但差异无统计学意义(P>0.05);与共培养对照组比较,共培养实验组QMMuC-1细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达水平升高(P<0.05);与单独培养实验组比较,共培养实验组 QMMuC-1 细胞中 IL-1 β 和 TNF-α mRNA 表达水平升高(P<0.05).结论:LPS可能通过诱导小胶质细胞激活后释放炎症因子作用于Müller细胞,并加剧了Müller细胞的炎症反应.

关键词：Müller细胞、小胶质细胞、共培养、脂多糖、炎症反应

所属期刊栏目：49

分类号：R774.1(眼科学)

资助基金：国家自然科学基金;广东省科技厅基础与应用基础研究基金项目;广东省清远市人民医院医学科研基金项目

在线出版日期：2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1140-1146