Ghrelin对脂肪间充质干细胞神经分化的影响

摘要：

目的:探讨Ghrelin联合LY294002对脂肪间充质干细胞(ADSCs)神经分化的影响,并阐明其作用机制.方法:倒置相差显微镜下观察ADSCs形态表现,流式细胞术鉴定ADSCs表面抗体阳性表达率,将第4代ADSCs分为对照组(不进行干预)、LY294002组[给予40μmol·L-1磷酸酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路特异抑制剂LY294002]、Ghrelin组(给予0.1μmol·L-1 Ghrelin)、Ghrelin+LY294002组(给予40μmol·L-1 LY294002+0.1μmol·L-1 Ghrelin).倒置相差显微镜下观察各组ADSCs神经分化后的形态表现,免疫荧光染色法检测各组ADSCs中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(Nestin)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞百分率,Western blotting法检测各组ADSCs中PI3K/Akt通路蛋白表达水平,并计算磷酸化PI3K(p-PI3K)/PI3K和磷酸化Akt(p-Akt)/Akt比值.结果:ADSCs表面抗体CD90和CD13高表达,CD34、CD45和CD106低表达.与对照组比较,LY294002组仅部分细胞由长梭形转变为类圆形胞体,突起较短、数量减少,而Ghrelin组细胞由长梭形转变为类圆形胞体速度增快;与LY294002组比较,Ghrelin+LY294002组细胞由长梭形转变为类圆形胞体速度增快,且突起数量增加.与对照组比较,LY294002组ADSCs中NSE和Nestin阳性细胞百分率及p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值明显降低(P<0.05),Ghrelin组ADSCs中NSE和Nestin阳性细胞百分率及p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值升高(P<0.05);与LY294002组比较,Ghrelin+LY294002组ADSCs中NSE和Nestin阳性细胞百分率及p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值升高(P<0.05);各组ADSCs中GFAP阳性细胞百分率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:Ghrelin通过激活PI3K/Akt通路促进ADSCs神经分化.

关键词：Ghrelin、LY294002、脂肪间充质干细胞、神经分化、磷酸酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路

所属期刊栏目：48

分类号：R74(神经病学与精神病学)

资助基金：黑龙江省科技厅自然科学基金联合引导项目LH2020H074

在线出版日期：2022-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1490-1497