不同发育期小鼠卵巢组织中Wnt5a蛋白表达水平及其对卵母细胞自噬的影响

摘要：

目的:探讨不同发育期小鼠卵巢组织中Wnt5a蛋白表达水平,并阐明Wnt5a对卵母细胞自噬的影响.方法:收集不同发育期小鼠卵巢组织,采用Western blotting法检测Wnt5a蛋白在小鼠围产期卵巢组织中的表达水平,选取新生1 d(1 dpp)小鼠卵巢组织进行免疫荧光染色,将卵母细胞胞质标记物DDX4和颗粒细胞标记物FOXL2(红色)分别与Wnt5a(绿色)和细胞核标记物Hoechst(蓝色)共染后,观察卵母细胞形态和数量.体外培养胚胎期17.5 d(17.5 dpc)小鼠卵巢组织,分为对照组、1 mol·L-1过表达Wnt5a组(rWnt5a组)、1 mol·L-1抑制剂IWP2组和1 mol·L-1抑制剂BOX5组,采用Western blotting法检测各组小鼠卵巢组织中Wnt5a、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和P62蛋白表达水平,免疫荧光法观察卵巢卵母细胞数量.结果:Wnt5a在不同发育阶段小鼠卵巢组织中均有表达,与13.5 dpc组比较,17.5 dpc和1 dpp组Wnt5a蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),荧光定位发现目的蛋白Wnt5a与标记物DDX4和FOXL2有重叠部分.Western blotting法检测,与对照组比较,rWnt5a组Wnt5a蛋白表达水平明显升高(P<0.01),抑制剂IWP2组Wnt5a和LC3蛋白表达水平明显降低(P<0.01),抑制剂BOX5组Wnt5a蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与rWnt5a组比较,抑制剂IWP2组LC3蛋白表达水平明显降低(P<0.01),P62蛋白表达水平明显升高(P<0.01).免疫荧光染色,与对照组比较,抑制剂IWP2组卵巢中卵母细胞数目减少.结论:Wnt5a可能通过影响小鼠卵巢内自噬水平调控卵母细胞的存活.

关键词：Wnt5a、卵巢组织、卵母细胞、颗粒细胞、自噬

所属期刊栏目：48

分类号：Q955(动物学)

资助基金：国家自然科学基金;国家重点研发计划

在线出版日期：2022-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：277-283