Ndfip1质粒的构建及其在神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中的表达
目的:观察Nedd4家族反应蛋白1(Ndfip1)过表达条件下神经细胞中二价金属离子转运蛋白1(DM T1)的表达,探讨Ndfip1对DM T1的调控作用.方法:构建Ndfip1真核表达质粒,应用Ndfip1质粒转染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,检测转染效率.Ndfip1质粒转染的SH-SY5Y细胞为实验组,空质粒转染的SH-SY5Y细胞为对照组,应用免疫荧光法观察2组细胞中DM T1蛋白表达强度,采用蛋白印迹法定量检测2组细胞DM T1蛋白表达水平.结果:Ndfip1质粒经扩增、电泳分离和测序比对,证明质粒构建成功.Ndfip1质粒转染48 h后,与转染前比较,SH-SY5Y细胞中Ndfip1蛋白表达水平明显增加(P<0.01),证明转染成功.免疫荧光法检测,与对照组比较,实验组细胞中DM T1的荧光强度明显减弱.蛋白印迹法检测,与对照组比较,实验组细胞中DMT1蛋白表达水平明显降低(P<0.05).结论:Ndfip1过表达可下调神经细胞中DMT1蛋白的表达,Ndfip1对DM T1具有负性调控作用,通过减少神经细胞中铁离子的蓄积对神经细胞起到保护作用.
Nedd4家族反应蛋白1、二价金属离子转运蛋白1、质粒、神经细胞
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R329.3(人体形态学)
辽宁省科技厅自然科学基金资助课题20170540343;辽宁省教育厅大学生创新训练项目资助课题201710160000188
2019-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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825-829,后插1
