大鼠结肠原代成纤维细胞的分离、培养和鉴定
目的:建立简单高效的大鼠结肠成纤维细胞体外原代培养和鉴定方法,为进一步研究结肠纤维化疾病提供细胞模型.方法:取成年雄性Wistar大鼠结肠组织,采用组织块贴壁法进行成纤维细胞体外原代培养,胰酶联合差速组织块贴壁培养法分离成纤维细胞,HE染色观察细胞形态表现,免疫组织化学法观察细胞中波形蛋白(Vimentin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、S100钙结合蛋白A4(S100A4)和E钙黏蛋白(E-cadherin)的表达,并与大鼠胸主动脉平滑肌A7 R5细胞对比进行鉴定.结果:结肠组织块贴壁培养8 d后成纤维细胞爬出,12 d进入增殖时期,15～20 d基本长满.倒置显微镜下观察,细胞呈扁平多突的纺锤形或星形;HE染色,成纤维细胞核大,卵圆形,着色浅,核仁明显.免疫组织化学染色,成纤维细胞Vimentin呈阳性表达,α-SMA、S100A4和E-cadherin均呈阴性表达;对照组大鼠胸主动脉平滑肌A7R5细胞S100A4呈阴性表达,α-SMA、Vimentin和E-cadherin均呈阳性表达.结论:采用胰酶联合差速组织块贴壁培养法成功原代培养出大鼠结肠成纤维细胞.
结肠、成纤维细胞、原代培养、免疫组织化学、HE染色、Wistar大鼠
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Q813.1(生物工程学(生物技术))
吉林省教育厅"十二五"科学技术研究项目资助课题吉教科合字[2015]第349号;教育部国家级大学生创新创业训练计划项目资助课题201610199003;吉林省教育厅大学生创新创业训练计划项目资助课题2017101991035
2018-08-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
849-852,封3
