自然杀伤细胞联合他莫昔芬对乳腺癌细胞的杀伤作用及其机制
目的:通过体外实验观察自然杀伤细胞(NK细胞)联合他莫昔芬(TAM)对乳腺癌细胞(BCC)的协同杀伤作用,初步探讨其作用机制.方法:选用3种受体表达程度不同的BCC,设置空白对照组及TAM各浓度/时间梯度实验组,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,并确定最终实验浓度为5 μmol·L-1.设自然释放组、最大释放组、TAM组、NK细胞组和联合实验组(BCC+NK细胞+TAM),钙黄绿素-AM释放法观察不同效靶比下两者的联合杀伤作用.设空白对照组(NK细胞)、NK细胞+TAM组、NK细胞+BCC组和联合实验组,ELISA法检测各组NK细胞中TNF-α和IFN-γ水平.设空白对照组(NK细胞)、NK细胞+TAM组、NK细胞+BCC组和联合实验组,流式分析法分别检测NK活化性受体(NKp46)、NK抑制性受体(CD158a、CD158b、CD158b2和CD158e)表达水平.设空白对照组(BCC)、BCC+TAM组、BCC+NK细胞组和联合实验组,流式细胞术检测各组细胞中活化性配体(MICA、ULBP1和ULBP2)的表达水平.结果:MTT法检测,TAM对3种BCC的增殖抑制率具有明显的时间和浓度依赖性(P<0.05).钙黄绿素-AM释放法检测,随着效靶比的增加,与NK细胞组比较TAM组BCC杀伤率明显升高(P<0.01),且联合组杀伤率明显高于NK细胞组和TAM组(P<0.05).ELISA法检测,与空白对照组比较,各实验组无论有无BCC存在,NK细胞中分泌TFN-α和IFN-γ水平均升高(P<0.05或P<0.01),且与TAM联合后TFN-α和IFN-γ水平明显升高(P<0.05).流式细胞术检测,与空白对照组比较,各实验组NK细胞中NKp46表达水平均升高(P<0.05);各实验组NK细胞中CD158a、CD158b、CD158b2和CD158e表达水平均明显下降(P<0.05);各实验组BCC中MICA、ULBP1和ULBP2表达水平均明显升高(P<0.05).结论:NK细胞与TAM联合体外杀伤BCC具有协同作用,其协同作用机制可能为TAM能够通过促进NK细胞分泌 TNF-α和IFN-γ而增强其杀伤能力;通过增加NK细胞活化性受体和活化性配体表达水平、降低NK细胞抑制性受体表达水平,进而增加NK细胞的杀伤能力.
乳腺肿瘤、他莫昔芬、内分泌治疗、免疫治疗
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R733.6(肿瘤学)
吉林省科技厅自然科学基金资助课题20160101028JC
2017-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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281-287
