小鼠肾脏足细胞的原代培养和鉴定

摘要：

目的:建立可操作性好、简单易行且效率较高的小鼠肾脏足细胞分离及原代培养模式,为其进一步研究奠定基础.方法:取C57/BL6J小鼠肾脏,通过差异过筛法获取300目筛的肾小球,用制备好的KI-3T3培养基重悬肾小球后静置于铺被鼠尾胶原的培养皿中,4d后开始换液,7d后开始胰蛋白酶消化肾小球,并开始足细胞传代培养.5～7 d传代1次,传代2～3次后收集细胞鉴定.采用倒置扭转显微镜观察小鼠肾脏足细胞形态表现,采用PCR法检测小鼠肾脏足细胞中nephrin,podocin和P-cadherin的表达.结果:肾小球种植3d后可见足细胞从组织中爬出,足细胞传代培养7d后在倒置相差显微镜下可观察到细胞胞体有突起生长.PCR法检测,分离培养的足细胞表达nephrin、podocin和P-cadherin.结论:差异过筛结合消化酶技术能够成功分离培养C57/BL6J小鼠肾脏足细胞.

关键词：肾脏、足细胞、原代培养

所属期刊栏目：43

分类号：Q813.11(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金地区项目资助课题81360114;甘肃省科技厅技术研究与开发专项计划资助课题1305TCYA035;甘肃省卫计委行业项目资助课题GSWSKY-2015-12;甘肃省委组织部陇原青年创新人才扶持计划资助课题甘组通字20144号

在线出版日期：2017-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：186-189,后插4