双抗体间接夹心ELISA法检测血清MUC1蛋白方法的建立及其在肺癌诊断中的应用
目的:建立双抗体间接夹心酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒,检测血清黏蛋白1(MUC1)水平,探讨其在肺癌诊断中的应用,阐明血清MUC1蛋白检测的临床应用价值.方法:在前期制备的MUC1蛋白和兔抗人MUC1多克隆抗体的基础上,建立以鼠抗人MUC1单克隆抗体为包被抗体,兔抗人MUC1多克隆抗体为检测抗体的双抗体间接夹心ELISA方法,并通过对MUC1蛋白标准品的检测,绘制出标准曲线.临床上收集48例肺癌患者、7例肺良性疾病患者和20例健康人的血清,应用本研究建立的ELISA方法检测各组标本血清MUC1蛋白表达水平,绘制ROC曲线,确定最佳cut-off值,得出双抗体间接夹心ELISA方法检测肺癌的敏感度、特异度及约登指数.同时与临床应用的CA15-3试剂盒检测结果进行比较.结果:应用双抗体间接夹心ELISA法确定血清MUC1的临界值为1.98 μg·L-1,检测肺癌的敏感度为62.5%,特异度为100%,约登指数为0.625 0.CA15-3试剂盒检测肺癌的敏感度为18.75%,特异度为100%,约登指数为0.187 5.结论:建立的双抗体间接夹心ELISA试剂盒检测肺癌有更高的敏感度和特异度,优于临床常用的CA15-3试剂盒.
黏蛋白1、抗黏蛋白1多克隆抗体、酶联免疫吸附法、肺肿瘤
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R392.1
国家自然科学基金资助课题30972782;吉林省自然科学基金资助课题201115049;"重大新药创制"科技重大专项资助课题2011ZX09102-001-36
2015-09-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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