肝癌相关成纤维细胞的培养和鉴定及其对肝癌细胞增殖的影响

摘要：

目的:分离、培养及鉴定原代肝癌相关成纤维细胞(hCAF),阐明其在肝癌发生发展中的作用.方法:采用酶消化法分离、纯化人hCAF,Western blotting法鉴定其相关蛋白标记物的表达,流式细胞术检测肝癌细胞Hep3B经hCAF上清处理后的增殖速度及细胞周期的变化,建立裸鼠移植瘤模型,观察hCAF对肝癌细胞生长的影响.结果:在肝癌组织标本中成功分离出hCAF,Western blotting结果显示hCAF特异性地高表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA).CCK8细胞增殖检测试剂盒检测证实,经hCAF上清处理后的Hep3B细胞增殖量为完全培养基处理48 h细胞增殖量的126.0％、125.0％及120.5％,细胞增殖量差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞术结果显示,经hCAF上清处理后的Hep3B细胞增殖速度及细胞周期中处于S期的细胞数目均高于完全培养基处理的Hep3B细胞(P＜0.05).hCAF与Hep3B共同接种至裸鼠皮下的成瘤体积[(1.34±0.52)cm3]明显大于单独接种Hep3B组[(0.51±0.09)cm3],差异有统计学意义(P＜0.05).结论:hCAF可以明显促进肝癌细胞系Hep3B的生长,其可能在肝癌生长过程中发挥重要作用.

关键词：癌相关成纤维细胞、肝细胞肿瘤、增殖、肿瘤微环境

所属期刊栏目：38

分类号：R322.47(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目资助课题NSFC 30972914;广东省科技计划项目资助课题2009B060700024;广东省自然科学基金面上项目资助课题10151008901000208;中山大学高校基本科研业务费重大项目培育基金资助课题10ykjc03

在线出版日期：2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：438-442,封2