重组钩端螺旋体多抗原位点同源合成基因的表达及其抗原性鉴定

摘要：

目的:构建重组钩端螺旋体(钩体)优势抗原表位原核表达系统,以期获得高纯度的钩体优势抗原表位重组融合蛋白,为进一步研究钩体快速检测方法奠定基础.方法:利用基因重组的方法构建表达质粒pET-rLP.经IPTG诱导后,获得高效表达带组氨酸标签的以包涵体形式存在的融合蛋白,包涵体蛋白经尿素变性溶解,采用镍离子亲和纯化,利用SDS-PAGE、Western blotting和间接ELISA法鉴定.结果:在相对分子质量为20000处有1条特异性蛋白条带,为重组钩体优势抗原表位融合蛋白;ELISA结果显示其可与钩体阳性血清特异性结合,而与其他血清无交叉反应.结论:成功构建重组钩体优势抗原表位原核表达系统,并获得高纯度的重组钩体优势抗原表位融合蛋白.

关键词：钩端螺旋体、原核表达、融合蛋白、活性鉴定

所属期刊栏目：38

分类号：R377.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助课题81072337;吉林大学研究生创新基金资助课题20111070;国家质量监督检验检疫总局科技计划项目资助课题2009IK214

在线出版日期：2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：404-408