重组BMP7真核表达载体的构建及其对关节软骨细胞的转染

摘要：

目的:构建pcDNA3.1-BMP7真核表达载体,并探讨转染关节软骨细胞的脂质体和DNA的最佳比例及BMP7基因表达.方法:构建pcDNA3.1-BMP7真核表达载体.用脂质体将pcDNA3.1-BMP7包裹形成DNA脂质体复合物,转染家兔关节软骨细胞,G418筛选.转染过程中确定脂质体浓度、脂质体与pcDNA3.1-BMP7质粒的比例.原位杂交、PCR、Western blotting测定BMP7表达.结果:构建了pcDNA3.1-BMP7真核表达载体,脂质体与pcDNA3.1-BMP7质粒最佳转染浓度为3 mL培养液中加10μL脂质体和4μgpcDNA3.1-BMP7质粒(2.5:1);以400 mg·L-1G418的正常培养液筛选28 d,BMP7为阳性表达.结论:在脂质体介导下,pcDNA3.1-BMP7转染家兔关节软骨细胞获得成功,且BMP7在该细胞中稳定表达.

关键词：基因转染、软骨细胞、骨形成蛋白-7、真核表达载体

所属期刊栏目：31

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中国科学院项目（非规范项目）30271319

在线出版日期：2006-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：819-823