幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白的诱导表达与活性鉴定

摘要：

目的:优化幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白诱导表达的条件,以提高目的蛋白的产量.方法:表达幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白的重组基因工程菌BL21(pET-HU27)在不同温度下(25℃、37℃)以不同的IPTG浓度(0.3、1.0和2.0 mmol·L-1)和不同的培养基(LB、SOC)中分别诱导表达不同时间,表达产物经超声破碎后,进行融合蛋白可溶性分析,并用Western blotting对表达产物进行鉴定.结果:SDS-PAGE结果显示,37℃时,LB培养基中,0.3 mmol·L-1的IPTG浓度诱导5 h时,融合蛋白的含量最高为21.51%;25℃,SOC培养基中,1.0 mmol·L-1的IPTG浓度诱导8 h时,可溶性HspA-UreB融合蛋白含量最高为34.58%,表达产物能够被免疫小鼠血清识别.结论:实现了幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白在原核细胞中的高效表达,并具有良好的免疫活性,为进一步开发应用以该融合蛋白为抗原的幽门螺杆菌疫苗打下了坚实的基础.

关键词：螺杆菌、幽门、HspA-UreB融合蛋白、基因表达、包涵体

所属期刊栏目：31

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：河南省科技厅科技攻关计划;河南省卫生厅医学科技创新人才工程项目

在线出版日期：2005-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：724-727