凝血因子Ⅷ C2结构域表达载体的构建及其在真核细胞NIH3T3中的表达

摘要：

目的:构建人凝血因子FⅧ中具有免疫活性的C2结构域表达载体并通过真核宿主细胞表达出多肽.方法:从HEK293细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增获得目的片段.将该片段与信号肽共同构建在同一表达载体,并在NIH3T3细胞中表达,Western blotting检测.结果:经限制性酶切鉴定和测序分析证实,采用RT-PCR成功地完成FⅧ-C2 cDNA的扩增和表达载体的构建,重组载体转染进入NIH3T3细胞后,经检测培养上清中的蛋白成分证实,成功地表达出FⅧ-C2结构域多肽.结论:重组表达载体的构建是表达出分泌型FⅧC2多肽的一种可行的方法.

关键词：因子Ⅷ、C2结构域、逆转录聚合酶链反应、基因重组

所属期刊栏目：31

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中国博士后科学基金2003

在线出版日期：2005-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：35-38,63