左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经血管单元联动损伤的调控作用及其机制

摘要：

目的 探讨左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症(DD)大鼠海马神经血管单元(NVU)联动损伤的调控作用及其潜在机制.方法 原代分离、纯化和培养SD大鼠海马神经元(Ne)、星形胶质细胞(As)与脑微血管内皮细胞(Bm),并对其进行免疫荧光染色鉴定;采用高糖联合皮质酮及Transwell小室干预构建DD海马NVU细胞模型;实验设正常组、模型组、空白血清组、左归降糖解郁方含药血清组.造模及给药18 h后,检测海马NVU跨内皮细胞电阻值(TEER)及4 h渗漏试验液面高度值;采用ELISA法分别检测Bm分泌蛋白白血病抑制因子(LIF)及As分泌蛋白转化生长因子 β(TGF-β)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)含量;采用免疫荧光联合高内涵细胞成像(HCA)分别检测Bm结构蛋白的闭合蛋白-1(claudin-1)、紧密连接蛋白(occludin)及As结构蛋白的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、缝隙连接蛋白-43(CX43)表达水平;采用CCK-8法检测NVU中海马神经元细胞活力;采用Tunel染色法检测NVU中海马神经元细胞凋亡情况.结果 与正常组比较,模型组及空白血清组TEER值明显降低、4 h渗漏试验液面高度值明显升高,Bm分泌蛋白LIF及As分泌蛋白TGF-β、GDNF含量明显降低,Bm结构蛋白claudin-1、occludin及As结构蛋白GFAP、CX43表达下调,海马神经元细胞存活率下降,同时细胞凋亡明显增多;与模型组比较,左归降糖解郁方含药血清组TEER值显著增加、4 h渗漏试验液面高度值明显下降,分泌蛋白LIF、TGF-β、GDNF及结构蛋白claudin-1、occludin、GFAP、CX43表达显著上调,同时海马神经元细胞存活率增加,细胞凋亡显著减少.结论 左归降糖解郁方对DD大鼠海马NVU联动损伤具有明显的调控作用,其作用机制与改善海马NVU屏障功能、分泌功能及基础结构有关.

关键词：左归降糖解郁方、糖尿病并发抑郁症、神经血管单元、联动损伤、凋亡、大鼠

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家重大新药创制科技重大专项;国家自然科学基金项目;湖南省卫健委科研项目;湖南中医药大学中医学一流学科开放基金项目;湖南中医药大学中医学国内一流建设学科项目

在线出版日期：2020-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：918-926