高尔基体蛋白73单克隆抗体的制备和鉴定

摘要：

目的 探讨高尔基体蛋白73(GP73)鼠源单克隆抗体的制备方法并进行鉴定.方法 用GP73重组抗原蛋白免疫5只小鼠获得血清抗体,免疫小鼠脾细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合,经过筛选后选择GP73抗体阳性杂交瘤细胞进行克隆化培养,通过腹水制备获得高特异性和高效价的GP73单克隆抗体(单抗).结果 成功筛选出11株能稳定分泌特异性GP73单抗的杂交瘤细胞株,经多次复苏传代仍能稳定分泌特异性强、效价高的抗体.11株单抗均能结合天然状态下的GP73蛋白,与无关蛋白均无交叉反应,提示有较强的特异性.应用筛选出的配对GP73单抗可检测出浓度为1ng/ml的GP73基因工程表达抗原.结论 制备的GP73杂交瘤细胞株分泌的抗体对GP73蛋白具有特异亲和性,并且有较高效价,为GP73蛋白诊断试剂的研制提供了关键技术基础.

关键词：高尔基体蛋白73、杂交瘤、单克隆抗体、酶联免疫吸附测定、细胞免疫荧光

所属期刊栏目：35

分类号：R38;P75

资助基金：北京市肝病研究所2012年度双十计划项目Z121107002812113

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：440-442,前插3