乙型肝炎病毒复制表达载体的构建与表达

摘要：

目的 构建乙型肝炎病毒(HBV)复制表达载体,验证其在HepG2细胞系中的复制和表达.方法 通过引物设计合成,以实验室构建的HBV C1亚型质粒通过PCR、酶切、克隆等分子生物学技术,构建HBV复制表达载体.利用转染试剂(Fugene HD Transfection Reagent)将载体质粒导入HepG2细胞,分别检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)和HBV DNA在不同时间点的表达.结果 酶切和测序结果均证实载体构建成功,通过瞬时转染细胞证实培养上清液中可检测到HBsAg、HBeAg和HBV DNA.结论 利用分子克隆技术成功构建了HBV复制表达载体,可以在HepG2细胞系中复制表达.通过进一步改造,可以为HBV表型耐药以及复制活性研究提供支持.

关键词：乙型肝炎病毒、HBV复制子、HepG2、瞬时转染

所属期刊栏目：35

分类号：R39;R51

资助基金：国家自然科学基金面上项目81272266;国家自然科学基金青年科学基金81100288;北京市卫生局215人才工程基金

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：200-203