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晚期自噬在非酒精性脂肪肝中的促凋亡作用

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目的 在非酒精性脂肪肝体外模型中研究油酸长期刺激对自噬的影响及其作用.方法 用含浓度为400 μmol/L油酸的DMEM高糖培养基培养肝癌HepG2细胞,制作体外非酒精性脂肪肝细胞模型.向肝癌HepG2细胞转染GFP-LC3质粒,通过观察LC3Ⅱ绿色荧光斑点确定自噬的发生.采用PI3k抑制剂LY294002抑制自噬.用抗M30抗体对培养的细胞爬片做免疫组化来确定凋亡细胞.荧光定量PCR确定凋亡相关基因BCL2和BAX的表达.结果 油酸刺激肝癌HepG2细胞12h时自噬水平很低,36 h后自噬水平再次显著升高.抗M30抗体免疫组化结果显示12h时肝癌HepG2细胞开始凋亡,至36 h时有52%细胞出现凋亡.LY294002处理可使12h和36 h的自噬消失,并且也明显减弱了凋亡的发生.凋亡相关基因BCL2和BAX的基因转录水平在油酸处理的12h和36 h无显著性差异,LY294002处理也未引起两者转录的显著改变.结论 油酸长期刺激肝癌HepG2细胞可以引起自噬介导的凋亡,但该凋亡发生的机制可能和BCL2/BAX基因转录水平的调节无关.

非酒精性脂肪肝、自噬、凋亡

33

R73;R24

国家自然科学基金81071843和30910103915;首都医学发展科研基金2007-2050

2013-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共3页

950-952

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北京医学

0253-9713

11-2273/R

33

2011,33(12)

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