NY-ESO-1抗原T细胞受体基因慢病毒载体的构建及鉴定

摘要：

目的 构建NY-ESO-1抗原T细胞受体基因(T Cell Receptor,TCR)的慢病毒载体并获得重组慢病毒.方法 设计特异性NY-ESO-1 TCR的引物,用聚合酶链反应(PCR)对我们前期已克隆的NY-ESO-1 TCR cDNA进行体外扩增,双酶切后定向插入到pCL20c-MSCV-GFP质粒,构建NY-ESO-1抗原特异性TCR基因的重组慢病毒载体pCL20c-MSCV-ESOTCR,并经酶切、PCR及测序鉴定.用pCL20c-MSCV-ESOTCR、pCL20c-HIV-gp、pCAG4-RTR2和CAG-VSV-G共转染T293包装细胞,获得上清,上清浓缩后感染Hela细胞,观察ESOTCR基因及蛋白水平的表达.结果 经PCR及测序证实,成功构建重组慢病毒载体pCL20c-MSCV-ESOTCR,包装产毒后感染Hela细胞,RT-PCR法及荧光显微镜均能检测及观察到基因及蛋白水平的表达.结论 成功构建了表达NY-ESO-1抗原T细胞受体基因(T Cell Receptor,TCR)的重组慢病毒载体.

关键词：NY-ESO-1T细胞受体、慢病毒载体、Hela细胞

所属期刊栏目：32

分类号：R39;R73

资助基金：北京市自然科学基金7092044;留学人员科技活动项目择优资助205

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：951-954